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- 產(chǎn)品名稱：Amplite?小鼠載脂蛋白A1（ApoA1）試劑盒
- 產(chǎn)品型號(hào)：V101070
- 產(chǎn)品展商：AAT Bioquest
- 產(chǎn)品文檔：無(wú)相關(guān)文檔
簡(jiǎn)單介紹
小鼠載脂蛋白A1（ApoA1）試劑盒*針對(duì)ELISAPro自動(dòng)ELISA處理進(jìn)行了優(yōu)化*
產(chǎn)品描述
Amplite?小鼠載脂蛋白A1（ApoA1）試劑盒*針對(duì)ELISAPro自動(dòng)ELISA處理進(jìn)行了優(yōu)化*
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貨號(hào)
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V101070
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存儲(chǔ)條件
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Multiple
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規(guī)格
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96 Tests
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價(jià)格
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Ex (nm)
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Em (nm)
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分子量
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溶劑
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產(chǎn)品詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品訂購(gòu)：QQ:1485814040
聯(lián)系電話：18691576690
02968064558
簡(jiǎn)要概述
Mabtech的經(jīng)過(guò)仔細(xì)驗(yàn)證的ELISAPRO試劑盒提供了所有必需的試劑，以方便，可靠，特異的方式方便地定量測(cè)定血清，血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的分析物。
ELISA測(cè)定原理
ELISAPRO試劑盒隨附有預(yù)先涂有單克隆抗體（mAb）。樣品中的分析物被包被的mAb捕獲，并被生物素化的檢測(cè)mAb和鏈霉親和素-HRP（SA-HRP）檢測(cè)。注：TMB底物的添加將導(dǎo)致底物出現(xiàn)顏色。用硫酸終止反應(yīng)，并且可以使用ELISA板酶標(biāo)儀定量光密度。通過(guò)與平行分析的ELISA標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋液比較來(lái)確定分析物的濃度。
所需材料
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酶標(biāo)儀可在450 nm讀取
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ELISA平板清洗器；自動(dòng)或手動(dòng)（例如，多移液管或噴射瓶）、精密移液管，吸頭和量筒
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用于標(biāo)準(zhǔn)和樣品稀釋的試管
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蒸餾水或去離子水
**信息
Stop溶液0.18 M H2SO4（<1％）對(duì)眼睛和皮膚有刺激性，應(yīng)小心處理。由于不知道暴露的影響，因此應(yīng)仔細(xì)處理該標(biāo)準(zhǔn)。溶液中的緩沖液和試劑含有防腐劑Kathon CG（0.002％），這是一種潛在的過(guò)敏原，可能通過(guò)皮膚接觸引起過(guò)敏。人和動(dòng)物樣品應(yīng)被視為潛在危險(xiǎn)的生物材料。所有材料應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處理。有關(guān)更多信息，請(qǐng)查閱我們網(wǎng)站上的《**數(shù)據(jù)表》。
制備
在開(kāi)始測(cè)定之前，讓板和測(cè)定試劑達(dá)到室溫（TMB底物除外，*好使用冷底物）。
計(jì)劃板布局，使其一式兩份，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品和測(cè)定背景對(duì)照。每孔的體積不應(yīng)超過(guò)100μl。
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
樣品實(shí)驗(yàn)方案
儲(chǔ)備溶液配制
1.洗滌緩沖液
將50 ml洗滌緩沖液濃縮液添加到950 ml蒸餾水或去離子水中（足以完成1個(gè)板的所有洗滌步驟）。如果在20倍濃縮物中形成了晶體，則將其升至室溫并輕輕混合以溶解。
2.樣品稀釋液
通過(guò)用蒸餾水或去離子水將樣品稀釋液濃縮液稀釋5倍來(lái)準(zhǔn)備所需體積的樣品稀釋液。對(duì)于每個(gè)板，將30 ml樣品稀釋液添加到120 ml水中。
3.樣品
所有樣品均應(yīng)在樣品稀釋液中稀釋至少2倍。除去可見(jiàn)的沉淀物并在聚丙烯管/板中稀釋，應(yīng)在樣品之前添加緩沖液。高度溶血和高血脂的樣品可能會(huì)導(dǎo)致定量結(jié)果不準(zhǔn)確。含有超出分析標(biāo)準(zhǔn)范圍的高水平分析物的樣品將需要進(jìn)一步稀釋。
4.小鼠血清/血漿稀釋指南
根據(jù)對(duì)BALB / c和C57BL / 6樣品的重復(fù)分析，我們建議稀釋倍數(shù)為200,000X。**的移液非常重要，在稀釋步驟之間更換吸頭，并使用新鮮制成的稀釋液。試劑的含量足以重復(fù)使用。
5. ELISA標(biāo)準(zhǔn)
通過(guò)添加1 ml標(biāo)準(zhǔn)重構(gòu)緩沖液將ELISA標(biāo)準(zhǔn)液重構(gòu)為1μg/ ml的原液。不要攪拌。讓標(biāo)準(zhǔn)液溶解20分鐘并徹底混合。標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)等份保存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
6.編制標(biāo)準(zhǔn)曲線
如圖所示，稀釋標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液以創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。指示的數(shù)量足以重復(fù)。*后一個(gè)樣品瓶用作測(cè)定背景對(duì)照，即應(yīng)省略標(biāo)準(zhǔn)液。在使用30分鐘內(nèi)準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
工作溶液配制
1.檢測(cè)抗體
使用后15分鐘內(nèi)，將檢測(cè)抗體在Apo ELISA緩沖液中稀釋至1μg/ ml的濃度。對(duì)于每個(gè)板，在12 ml Apo ELISA緩沖液中稀釋12μl檢測(cè)抗體。
2.鏈霉親和素
在使用后的15分鐘內(nèi)，將抗生蛋白鏈菌素-HRP用抗生蛋白鏈菌素-HRP稀釋劑稀釋1000倍。對(duì)于每塊板，在12 ml的鏈霉親和素-HRP稀釋液中稀釋12μl的鏈霉親和素-HRP。
操作步驟
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添加樣品（至少稀釋2倍），標(biāo)準(zhǔn)液和測(cè)定背景對(duì)照（100μl/孔）。敲擊板混合。用粘性板蓋覆蓋板，并在室溫下孵育1小時(shí)。
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如上所述清洗板。
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添加檢測(cè)抗體（100微升/孔）。蓋好板并在室溫下孵育1小時(shí)。
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如上所述清洗板。
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加入抗生蛋白鏈菌素-HRP（100μl/孔）。蓋好板并在室溫下孵育1小時(shí)。
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如上所述清洗板。
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添加TMB底物（100微升/孔）。在避開(kāi)直射光的室溫下孵育15分鐘。
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向所有孔（100μl/孔）中添加Stop溶液以停止顯影。
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在15分鐘內(nèi)測(cè)量450 nm處的吸光度。