Annexin V-Cy5.5標(biāo)記是美國(guó)AAT Bioquest研發(fā)的用于檢測(cè)細(xì)胞功能的探針，膜聯(lián)蛋白是鈣依賴(lài)性磷脂結(jié)合蛋白家族。  我們的膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物是一組監(jiān)測(cè)細(xì)胞功能的工具，旨在通過(guò)測(cè)量磷脂酰絲氨酸的易位來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞凋亡。

        膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物在Ca²⁺存在下與凋亡細(xì)胞表面上的PS結(jié)合，它也可以通過(guò)壞死細(xì)胞膜或死細(xì)胞并與細(xì)胞內(nèi)部的PS結(jié)合。 因此，我們建議將細(xì)胞不可滲透的核染色與膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物結(jié)合使用，以區(qū)分死細(xì)胞和凋亡細(xì)胞。

數(shù)據(jù)分析

        下圖是使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸在Jurkat細(xì)胞凋亡中的結(jié)合活性的實(shí)例。 在活的非凋亡細(xì)胞中，膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450檢測(cè)非誘導(dǎo)細(xì)胞中的先天性細(xì)胞凋亡，其通常為所有細(xì)胞的2-6％。 在凋亡細(xì)胞中，膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，磷脂酰絲氨酸位于細(xì)胞膜的外部小葉上，導(dǎo)致染色強(qiáng)度增加。

圖1.在Jurkat細(xì)胞中檢測(cè)膜聯(lián)蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰絲氨酸的結(jié)合活性。 將Jurkat細(xì)胞在37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中不用（藍(lán)色）或用1μM星形孢菌素（紅色）處理5小時(shí)，然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分鐘。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式細(xì)胞儀，使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下測(cè)量膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450的熒光強(qiáng)度。

簡(jiǎn)介
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