Annexin V-Cy5標記是美國AAT Bioquest研發(fā)的用于檢測細胞功能的探針，膜聯(lián)蛋白是鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白家族。 它們富含真核生物，屬于參與信號轉(zhuǎn)導的普遍存在的細胞質(zhì)蛋白家族。 膜聯(lián)蛋白V的優(yōu)先結(jié)合配偶體是磷脂酰絲氨酸（PS），其通常保持在細胞膜的內(nèi)葉（細胞質(zhì)側(cè)）。 在細胞凋亡中，PS被轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外部小葉。 磷脂酰絲氨酸在細胞表面上的出現(xiàn)是細胞凋亡的初始/中間階段的通用指示，并且可以在觀察到形態(tài)變化之前檢測到。 我們的膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物是一組監(jiān)測細胞功能的工具，旨在通過測量磷脂酰絲氨酸的易位來監(jiān)測細胞凋亡。

數(shù)據(jù)分析

        下圖是使用流式細胞儀檢測膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸在Jurkat細胞凋亡中的結(jié)合活性的實例。 在活的非凋亡細胞中，膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450檢測非誘導細胞中的先天性細胞凋亡，其通常為所有細胞的2-6％。 在凋亡細胞中，膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，磷脂酰絲氨酸位于細胞膜的外部小葉上，導致染色強度增加。

圖1.在Jurkat細胞中檢測膜聯(lián)蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰絲氨酸的結(jié)合活性。 將Jurkat細胞在37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中不用（藍色）或用1μM星形孢菌素（紅色）處理5小時，然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分鐘。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式細胞儀，使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下測量膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450的熒光強度。

參考文獻

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors: Brad Larson, Peter Banks
Journal: Experimental Biology (2017)

Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors: Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal: Journal of Controlled Release (2017)

公司簡介
西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學試劑及其試劑盒的高新技術(shù)企業(yè)；主要以熒光探針，分子探針，核酸/蛋白質(zhì)標記、細胞檢測等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心，產(chǎn)品應用于基因合成、細胞檢測、活體示蹤，抗體標記、新藥篩選等領(lǐng)域。

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