公司簡介
西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學(xué)試劑及其試劑盒的高新技術(shù)企業(yè)；主要以熒光探針，分子探針，核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心，產(chǎn)品應(yīng)用于基因合成、細(xì)胞檢測、活體示蹤，抗體標(biāo)記、新藥篩選等領(lǐng)域。
Cell Meter PE-Annexin V細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測細(xì)胞凋亡的試劑盒，膜聯(lián)蛋白V可以與包括PE的熒光染料結(jié)合。該染料保留了其對磷脂酰絲氨酸（PS）的高親和力，因此可用作流式細(xì)胞術(shù)分析正在經(jīng)歷細(xì)胞凋亡的細(xì)胞的敏感探針。由于PS的外化發(fā)生在細(xì)胞凋亡的早期階段，PE膜聯(lián)蛋白V染色可以比基于核變化（例如DNA片段化）的測定更早地鑒定細(xì)胞凋亡。 PE膜聯(lián)蛋白V染色先于膜完整性的喪失，膜完整性伴隨由凋亡或壞死過程導(dǎo)致的新細(xì)胞死亡階段。因此，用PE膜聯(lián)蛋白V染色通常與碘化丙啶（PI）或7-AAD等活體染料結(jié)合使用，使研究者能夠鑒別早期凋亡細(xì)胞（7-AAD陰性，PE膜聯(lián)蛋白V陽性）。
數(shù)據(jù)分析
在活的非凋亡細(xì)胞中，RPE-膜聯(lián)蛋白V檢測非誘導(dǎo)細(xì)胞中的先天性細(xì)胞凋亡，其通常為所有細(xì)胞的2-6％。 在凋亡細(xì)胞中，RPE-膜聯(lián)蛋白V與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，磷脂酰絲氨酸位于細(xì)胞膜的外葉上，因此導(dǎo)致染色強(qiáng)度增加。
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圖1.使用Cell Meter RPE-膜聯(lián)蛋白V結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測RPE-膜聯(lián)蛋白V對Jurkat細(xì)胞中磷脂酰絲氨酸的結(jié)合活性。 將Jurkat細(xì)胞在37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中在沒有（藍(lán)色）或1μM星形孢菌素（紅色）的情況下處理4-5小時，然后用RPE-膜聯(lián)蛋白V染色30分鐘。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson）流式細(xì)胞儀使用FL2通道測量RPE-膜聯(lián)蛋白V的熒光強(qiáng)度。
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參考文獻(xiàn)
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Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
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Eurycomanone induce apoptosis in HepG2 cells via up-regulation of p53
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Glycogen synthase kinase-3 and Omi/HtrA2 induce annexin A2 cleavage followed by cell cycle inhibition and apoptosis
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