胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物 Z-DEVD-AMC 藍
貨號
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13421
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存儲條件
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f/l
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規(guī)格
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5 mg
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價格
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Ex (nm)
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339
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Em (nm)
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439
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分子量
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767.68
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溶劑
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DMSO
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產(chǎn)品詳細介紹
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簡要概述
胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物 Z-DEVD-AMC 藍是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的熒光底物,一種含有芐氧羰?;?Z)的Caspase 3熒光底物,一種蛋白酶,當細胞暴露在細胞凋亡的條件下時具有快速催化活性;會切斷多聚(ADP-ribose)聚合酶。這種七-氨基-4氟甲基香豆素衍生物比七-氨基-4甲基香豆素衍生物具有更好的膜滲透性。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供上等的胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物 Z-DEVD-AMC 藍。
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產(chǎn)品說明書
樣品實驗方案
以下說明書僅提供指南,實際應根據(jù)您的具體需求進行修改。
1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase測定
1.1在DMSO中制備10mM儲備溶液。
1.2制備2X半胱天冬酶底物(50μM)測定溶液,如下所示:
50 L基質(zhì)原液
100L DTT(1M)
400L EDTA(100 mM)
10mL Tris緩沖液(20mM),pH = 7.4
1.3將等體積的半胱天冬酶標準品或樣品與2X半胱天冬酶底物測定溶液(來自步驟1.2)混合,并在室溫下孵育溶液至少1小時。
1.4使用熒光酶標儀檢測熒光,或使用吸光度酶標儀檢測吸光度。
2.細胞Caspase檢測使用細胞滲透FMK半胱天冬酶探針
2.1在DMSO中制備2-5mM儲備溶液。
2.2根據(jù)需要對細胞進行處理。
2.3通過用20mM Hepes緩沖液(HHBS)稀釋Hanks中的DMSO儲備溶液(來自步驟2.1),制備2X可滲透的半胱天冬酶底物(20μM)測定溶液。
2.4用2X半胱天冬酶底物測定溶液(來自步驟2.3)混合等體積的處理細胞,并將細胞在37℃,5%CO 2培養(yǎng)箱中孵育至少1小時。
2.5用HHBS洗滌細胞至少一次。
2.6用流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監(jiān)測熒光強度。
3.細胞Caspase檢測使用細胞滲透性FMK Caspase探針(僅適用于#13470-13476)
3.1通過向小瓶中加入50μLDMSO制備250X儲備溶液。
3.2根據(jù)需要對細胞進行處理。
3.3將250 X DMSO儲備溶液(來自步驟3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL細胞)添加到細胞溶液中,并將細胞在37°C,5%CO 2培養(yǎng)箱中孵育1 小時。
3.4用HHBS洗滌細胞至少一次。
3.5用流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監(jiān)測熒光強度。