在擴增反應(yīng)的線性部分期間進行PCR產(chǎn)物的測量，從而允許模板的準(zhǔn)確定量。幾種用于PCR產(chǎn)物的實時定量的方法，包括使用熒光標(biāo)記的引物或分子信標(biāo)的熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)。還可以使用Cyber Green 監(jiān)測反應(yīng)期間PCR產(chǎn)物的鑒定。此外，通過在線毛細(xì)管PCR結(jié)合激光誘導(dǎo)熒光檢測，向反應(yīng)混合物中添加Cyber Green 染色，檢測出單個DNA分子.Cyber Green 優(yōu)先結(jié)合dsDNA，可以準(zhǔn)確定量雙鏈產(chǎn)物。單鏈寡核苷酸引物的存在。 Cyber Green 在PCR反應(yīng)所需的極端溫度下具有高穩(wěn)定性，不會干擾Taq聚合酶。通過在測定后使用Cyber Green 測量產(chǎn)物的熔融溫度，可以實現(xiàn)定量所需產(chǎn)物的改進的特異性。沒有堿基錯配的雙鏈DNA將顯示比含有錯配的非特異性模板更高的解鏈溫度。實時定量PCR實驗可以通過使用專用于該應(yīng)用的儀器或通過在不同時間點手動量化擴增產(chǎn)物來進行。
使用Cyber Green 的實時定量PCR用于基因突變的可靠且簡單的測定，包括蚊子抗藥性基因的重復(fù)和缺失，人類**基因中的染色體易位和堿基替換。它還被用于鑒定病毒，**或**病原體。此外，該方法已成功用于定量逆轉(zhuǎn)錄PCR。
圖1.使用Cyber Green （Cat＃17591）對KIR基因（殺傷細(xì)胞**球蛋白樣受體）的10倍系列稀釋液（3×10 5至3個copies）進行實時定量PCR的擴增曲線。
相關(guān)產(chǎn)品訂購信息
|
貨號
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
價格
|
|
17004
|
氨基烯丙基-DUTP鈉鹽 4mM AA-dUTP
|
1 umole
|
1140
|
|
17021
|
氨烯丙基UTP鈉溶液 4mM AA-UTP
|
250 uL
|
3540
|
|
17016
|
1mM Biotin-11-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
|
17017
|
1mM Biotin-16-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
|
17018
|
1mM Biotin-20-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
|
17591
|
Cyber Green 20X水溶液PCR定量
|
5x1 ml
|
2340
|
|
17590
|
Cyber Green 核酸凝膠染料 10000X DMSO
|
1ml
|
5940
|
|
17024
|
1mM DEAC-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
|
17022
|
1mM Fluorescein-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
|
17011
|
1mM mFluor dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
|
395
|
6-ROX甘氨酸 25 uM熒光法PCR檢測參照液
|
5ml
|
2340
|
|
17023
|
1mM Tetramethylrhodamine-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
|
17006
|
1mM TF1-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
|
17007
|
1mM TF2-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
|
17008
|
1mM TF3-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
|
17009
|
1mM TF4-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
|
17010
|
1mM TF5-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
百螢生物是 AAT Bioquest 中國區(qū)域**代理商，為國內(nèi)提供 AAT 的原裝產(chǎn)品及產(chǎn)品定制、技術(shù)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！