Fluo-3和Fluo-4是*常用的可見光可激發(fā)的鈣離子指示劑。然而，Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后僅在活細(xì)胞中發(fā)生中度熒光，并且需要苛刻的細(xì)胞負(fù)載條件來*大限度的提高細(xì)胞鈣反應(yīng)。Fluo-8®染料已被開發(fā)用于改善細(xì)胞負(fù)載和鈣響應(yīng)，同時保持方便的Fluo-3和Fluo-4光譜波長，*大激發(fā)波長為~490 nm，*大發(fā)射波長為~520 nm。對于細(xì)胞培養(yǎng)，FLUO-8 ® AM只需要在室溫下培養(yǎng)，而Fluo-3 AM和的Fluo-4 AM則需要在37℃溫育需要。此外，F(xiàn)luo- 8®AM比Fluo-4 AM亮2倍，比Fluo-3 AM亮4倍。AAT Bioquest提供了一系列不同鈣親和力出色的Fluo-8 ®試劑。
Fluo-8® AM的主要特點：
? 在室溫條件下，比Fluo-3 AM和Fluo-4 AM更快，更容易裝入細(xì)胞。
? 比細(xì)胞中的Fluo-3 AM和Fluo-4 AM 更亮。
? 與Fluo-4 AM的光譜幾乎完全相同，十分方便。
圖1.用Fluo-8®AM（貨號 21080）和Fluo-4 AM在HEK-293細(xì)胞中測量卡巴酚劑量反應(yīng)。HEK-293細(xì)胞在96孔黑壁/透明底肋片中以40000個細(xì)胞/100μl/孔接種過夜。去除生長培養(yǎng)基，在室溫下用100μl含F(xiàn)luo-8®AM或Fluo-4 AM的染色液培養(yǎng)細(xì)胞1小時。通過NOVOstar添加卡巴膽堿（25μL/孔）以達(dá)到*終指示的濃度。在Ex / Em = 490 / 525nm下測量熒光信號。用Fluo-8測得卡巴膽堿的EC50 ® AM為約1.2μM。
圖2.在Costar 96孔黑壁/透明底板中以每孔100μL每孔40,000個細(xì)胞接種U2OS細(xì)胞過夜。去除生長培養(yǎng)基，37℃的HHBS中將細(xì)胞用100μL的4μM的Fluo-3 AM，F(xiàn)luo-4 AM和Fluo-8® AM（貨號：21080）孵育1小時。用200μLHHBS洗滌細(xì)胞兩次，然后使用FITC通道用熒光顯微鏡成像。
表2. Fluo-8®鈣離子指示劑
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貨號
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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價格
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21080
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F1uo-8?®，AM
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1mg
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2100
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21081
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Fluo-8?®，AM
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5x50 ug
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1140
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21082
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Fluo-8?®，AM
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10*50ug
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2100
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21083
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Fluo-8?®，AM
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20*50ug
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3540
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21086
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Fluo-8®，鈉鹽
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1mg
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3540
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21087
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Fluo-8®，鉀鹽
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1mg
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3540
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21088
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Fluo-8®，鈉鹽
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10x50 ug
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2340
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21089
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Fluo-8®，鉀鹽
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10*50ug
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2340
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21090
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Fluo-8H?, AM
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1mg
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3540
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21091
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Fluo-8H?, AM
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10*50ug
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2340
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21095
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Fluo-8H?, 鈉鹽
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10*50ug
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2340
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21096
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Fluo-8L?, AM
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1mg
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3540
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21097
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Fluo-8L?, AM
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10*50ug
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2340
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21098
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Fluo-8L?, 鈉鹽
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10*50ug
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2340
|
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21099
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Fluo-8L?, 鈉鹽
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1mg
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3540
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21100
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Fluo-8L?, 鉀鹽
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10*50ug
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2340
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21101
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Fluo-8L?, 鉀鹽
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1mg
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3540
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21102
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Fluo-8FF?,鉀鹽
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10*50ug
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2340
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21103
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Fluo-8FF?,鉀鹽
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1mg
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3540
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21104
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Fluo-8FF?, AM
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10*50ug
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2340
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21105
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Fluo-8FF?, AM
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1mg
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3540
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36307
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Screen Quest?Fluo-8鈣檢測試劑盒 *適合于難檢測細(xì)胞系
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1 Plate
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1140
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36308
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Screen Quest?Fluo-8鈣檢測試劑盒 *適合于難檢測細(xì)胞系
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10Plate
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4140
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36309
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Screen Quest?Fluo-8鈣檢測試劑盒 *適合于難檢測細(xì)胞系
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100Plate
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29400
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36314
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Screen Quest 免洗Fluo-8鈣檢測試劑盒
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1 Plate
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1140
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36315
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Screen Quest 免洗Fluo-8鈣檢測試劑盒
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10Plate
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4140
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36316
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Screen Quest 免洗Fluo-8鈣檢測試劑盒
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100Plate
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35400
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