線粒體染色試劑盒使用注意事項: M16染色液為DMSO溶液,冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解,吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預熱,否者容易再次凝固在吸頭內壁產生損耗。
使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。
細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
標記的條件因細胞種類而異,根據(jù)不同樣本的實際染色結果做相應調整,在每次實驗前,請先根據(jù)不同的實驗要求、細胞類型、細胞的膜通透性等進行優(yōu)化,確定zui佳條件。
線粒體染色試劑盒染色工作液配制:
根據(jù)樣本數(shù)量,用染料稀釋液將BBcellProbeTM M16熒光染料100倍稀釋,再用相應的培養(yǎng)基或者HBSS緩沖液20-400倍稀釋(對于后續(xù)需要做固定或透化的樣本,20-100倍稀釋),配制成染色工作液。
【注】:
也可以直接用相應的培養(yǎng)基或HBSS等緩沖液稀釋M16染料母液至所需濃度。
建議收到產品后,根據(jù)單次使用量,對母液進行小量分裝,每次使用一管,試劑-20℃避光凍存,一年穩(wěn)定。
開始實驗前,使用培養(yǎng)基或HBSS緩沖液稀釋儲存液到需要的工作濃度。工作濃度為根據(jù)不同細胞的預實驗結果確定的zui佳工作濃度,一般染色終濃度2000-40000倍稀釋。
為了降低過度加載染料導致的潛在背景和線粒體毒性,在不影響實驗結果的前提下應盡可能低濃度染色。另外,濃度過高也可能造成非特異性染色,對其他細胞結構進行染色。
工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
為了降低探針加載過度可能引起的假陽性,建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。
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