基本信息
貨號(hào):17515
儲(chǔ)存條件:保持在-20°C并干燥
物理化學(xué)特性
分子量:668.39
儲(chǔ)存:水或DMSO
激發(fā):535
發(fā)射:617
結(jié)構(gòu)式:
生物應(yīng)用
碘化丙啶(PI)屬于與溴化乙錠相同的化學(xué)類(lèi)別。 與溴化乙錠的情況一樣在與核酸結(jié)合后,其熒光增強(qiáng)20-30倍。 熒光激發(fā)值被紅移
對(duì)于30-40nm,熒光發(fā)射值藍(lán)移15nm左右。 PI也與RNA結(jié)合
DAPI和吖啶橙做。 PI通常用于鑒定細(xì)胞群中的死細(xì)胞并作為復(fù)染劑
多色熒光技術(shù)。 它還可用于區(qū)分壞死細(xì)胞,凋亡細(xì)胞和正常細(xì)胞。 這很合適用于熒光顯微鏡,流式細(xì)胞術(shù)和熒光測(cè)定法。
樣本細(xì)胞測(cè)定方案
PI染色通常在所有其他染色后進(jìn)行。 它只會(huì)污染死細(xì)胞。 以下程序即可適用于大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型。 生長(zhǎng)培養(yǎng)基,細(xì)胞密度,其他細(xì)胞類(lèi)型的存在和其他因素可能影響染色。 玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的真實(shí)或明顯的染色明亮染色的材料出現(xiàn)在有或沒(méi)有細(xì)胞存在的溶液中
1)。 制備1-10mM DMSO儲(chǔ)備溶液。 如果儲(chǔ)存在-20°C,DMSO儲(chǔ)備溶液可以使用6個(gè)月。
2)。 使用適合您樣品的固定方案。
3)。 通過(guò)離心沉淀細(xì)胞,并用染料將細(xì)胞重懸于緩沖鹽溶液或培養(yǎng)基中
在pH 7.4下染色。 培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。
4)。 使用0.5和5μM之間的濃度添加PI染色,并將其孵育15至60分鐘作為指導(dǎo)。
注意:在起初的實(shí)驗(yàn)中,在整個(gè)建議范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度
確定產(chǎn)生染色的濃度。
參考文獻(xiàn)
1. Baskic D, Popovic S, Ristic P, Arsenijevic NN. (2006) Analysis of cycloheximide-induced apoptosis in human leukocytes: Fluorescence microscopy using annexin V/propidium iodide versus acridin orange/ethidium bromide. Cell Biol Int, 30, 924.
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