基本信息
貨號:17030(25 mg)
儲存方式:-20℃避光
結(jié)構(gòu)式:
分子量:307.09
外觀:白色
儲存:DMSO
生物應(yīng)用
5-溴-2-脫氧尿苷(BrdU)是胸苷的類似物,可以摻入新合成的復(fù)制細(xì)胞DNA(S期細(xì)胞)中。 BrdU通常用于檢測活組織中的增殖細(xì)胞。 它通過在DNA復(fù)制過程中取代胸苷并將其自身整合到新合成的DNA中(在S期期間)起作用。 然后可以使用對BrdU特異的抗體來檢測摻入的化學(xué)物質(zhì),從而指示活躍地復(fù)制其DNA的細(xì)胞。 因為BrdU可以在細(xì)胞分裂的S期中替代胸苷,它可以引起突變。
染色細(xì)胞樣本分析
以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。生長培養(yǎng)基,細(xì)胞密度,其他細(xì)胞類型的存在和其他因素可能影響Brdu摻入。
1)。 制備1-10mM DMSO儲備溶液。 如果儲存在-20°C,DMSO儲備溶液可以使用6個月。
2)。 通過離心沉淀細(xì)胞并將細(xì)胞重懸于完全生長的培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。
3)。 使用5和20μM之間的濃度添加Brdu染色,并將其孵育60分鐘至過夜。 孵育時間取決于細(xì)胞類型和實(shí)驗?zāi)繕?biāo)。
4)。 用70-80%酒精或酸 - 乙醇固定細(xì)胞20-30分鐘。
5)。用PBS洗滌(3次,每次2分鐘)。
6)。 繼續(xù)進(jìn)行**細(xì)胞化學(xué)染色。
參考文獻(xiàn)
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